體視顯微鏡觀察濾色標(biāo)本時容易受到哪些影響
發(fā)布人:發(fā)布時間:2014/9/10
濾色標(biāo)本的影響
當(dāng)用相差體視顯微鏡觀察吸收光的染色標(biāo)本時,由振幅變化所引起的效果由于相板的擾亂是不會保留的,面這種細(xì)微結(jié)鉤上反差的損失,不一定能被在標(biāo)本變化基礎(chǔ)上最終像反差的增大所補(bǔ)償。特別是在標(biāo)本具有高折射率部分的情況下,會受到輪和作用帶的擾亂。一般來說,用相差體視顯微鏡觀察染色的常規(guī)切片時,與常規(guī)的振幅差所形成的像相比,觀察的結(jié)果被歪曲。并且本來就不是太好的像也可能完全被損壞。用染色標(biāo)本觀察所形成的像既不是一個真正的相差像,也不是一個常規(guī)的光吸收像。因此,實(shí)際上不吸收光的透明活體細(xì)心或組織是用于相差觀察的最理想的標(biāo)本。
但是在有些情況下使用染色標(biāo)本也可以得到較好的效果。在這里必須注意,無論使用何種染科,染色應(yīng)該很淡,而且一般應(yīng)染為單色,已褪色的陳舊標(biāo)本往往成為相差體視顯微鏡較好的觀察材料。此外,也可以使用活體染色的方法。在相差觀察時。應(yīng)該把觀察結(jié)果與普通明視野結(jié)果進(jìn)行比較,從各方面研究被觀察物體的性質(zhì)和結(jié)構(gòu)。
蓋玻片和載玻片的影響
用于相差觀察的標(biāo)本要蓋上蓋玻片,否則環(huán)狀光闌的亮環(huán)與物鏡相板的暗環(huán)很難重合,從而得不到適宜的反差,同時對玻片質(zhì)量的要求也比較嚴(yán)格。如泉玻片有劃痕、厚薄不均勻、成凸凹不平,亮環(huán)就會歪斜,從而嚴(yán)重影響像的質(zhì)量。
載玻片的厚度對像的質(zhì)量也有較大影響,玻片過厚,環(huán)狀光闌上的亮環(huán)變大,玻片過薄,亮環(huán)交小。連續(xù)觀察幾個標(biāo)本時,如載玻片厚度不同,要每次調(diào)焦,非常麻煩。凹窩載玻片由于各部分的光程不同,不能用于相差顯微觀察。
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